您现在的位置:首页
HilyMax实验结果-H1299细胞 (2011-1-6)
 
GFP转染实验效果图如下:
 
 
 
 
操作
1.    细胞接种
为了获得更好的转染效率,细胞的接种密度建议为50%-60%。接种后放培养箱预培养24小时左右。
     ·接种细胞前需调整好细胞状态,一般细胞在对数期活性最高。
     ·接种密度请合理调整,以保证实验后期细胞的状态保持良好。
2.    HilyMax-DNA复合物的制备(以12孔板为例)
⑴ 2 ug质粒(以GFP为例)加入到60 ul无血清DMEM培养基中,混匀,静置5分钟。
⑵ 2-4 ul HilyMax加入到另一管 60 ul无血清DMEM培养基中,混匀,静置5分钟。
     ·转染试剂HilyMax每次使用前请注意重新混匀。
     ·滴加HilyMax转染试剂时注意悬空操作,请勿接触离心管壁。
     ·一般讲HilyMax稀释液加入到质粒稀释液中,请勿颠倒滴加顺序。
⑶ 操作⑵的HilyMax稀释液滴加到⑴的质粒稀释液中,混匀,静置15分钟。
         ·此步操作的静止时间一般为15分钟,尽量不要超过30分钟。
⑷ 细胞培养板从培养箱中拿出,更换新鲜DMEM培养基,每孔500 ul为宜。
⑸ 操作⑶的HilyMax与质粒的混合液滴加到细胞培养孔中,轻摇混匀。
         ·做转染实验的培养板每孔培养基体积建议适当减少,例如12孔板加500 ul,以提高转染效率。
3.    放入培养箱培养24小时左右,获取GFP图像。
 
注意:
转染效率与细胞种类、细胞浓度及DNA与HilyMax的混合比例等诸多因素有关,请参考最优化操作条件。