U.S.A | EUROPE | JAPAN
  • 分 子 式:
  • 分 子 量:
  • 外      观:
  • 别      名:
  • 纯      度:
  • 储存条件: 0-5
  • 运输条件: 室温
搜索产品
您现在的位置:首页 > 产品中心 > 细胞铁死亡 > FerroOrange
FerroOrange
货号: F374

细胞铁离子检测荧光探针
CAS号:
规格
价格
到货期
1 tube1510现货
3 tubes3440现货

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

I、概述


铁是生物体内最丰富的过渡金属元素,它参与各种生理过程活动。 近年来,活细胞中的游离铁受到广泛关注。 游离铁最常以其稳定的氧化还原态存在,即亚铁离子(Fe2+)和铁离子(Fe3+)。对研究者来说,在研究细胞内的还原环境,金属转运蛋白和Fe2+的水溶性时,了解Fe2+的行为比了解Fe3+的行为更为重要。FerroOrange作为一种新型的荧光探针,可对活细胞内的Fe2+进行荧光成像。

     FerroOrange荧光谱图           FerroOrange与金属离子的选择性

                                                                     Bpy2,2'-Bipyridyl

   II、试剂盒内含

1 sample

FerroOrange·····24 µg ×1

3 samples

FerroOrange·····24 µg ×3

III注意事项

1.本试剂盒中的试剂,请恢复至室温再使用。

2.由于在运输过程中可能会因振动而使试剂粘附在管壁或管盖内侧,因此在打开前,请将试剂敲落至管底部。

3.加入FerroOrange染色剂后请立即观察,不要洗涤。

IV操作步骤

1.细胞接种于荧光培养皿中,在375% CO2培养箱中过夜培养。

2.去除上清液,并用HBSS或无血清培养基洗涤细胞3次。

3.更换含有药物的培养基,在375% CO2培养箱中培养。

 *请根据药物特性优化培养时间。

4.加入浓度为1 μmol/LFerroOrange工作液,在375% CO2培养箱中培养。

 *加入FerroOrange染色剂后请立即观察,不要洗涤。

5.在荧光显微镜下观察细胞。

 

                                                      FerroOrange检测细胞内Fe2+

V、实验例

FerroOrange检测HeLa细胞中的Fe2+

1.HeLa细胞接种在μ-Slide 8 well plate (ibidi)中,在375% CO2培养箱中过夜培养。

2.用无血清培养基洗涤3次后加入新鲜的无血清培养基

3.将硫酸亚铁铵(II)(ddH2O配置,浓度10 mmol/L)加入细胞中,终浓度:100 μmol/L

4. 375% CO2培养箱中培养30min后,HBSS洗涤3次。

5.将含有FerroOrange1μmol/ L)和2,2'-联吡啶(Bpy)(100 μmol/ L)的HBSS溶液加入细胞中,375% CO2培养箱中孵育30min

 

6.在荧光共聚焦显微镜下观察细胞。

 

                     FerroOrange检测细胞内Fe2+

Ex / Em = 561 nm / 570-620 nm                                 比例尺:20μm

A:对照组

B:硫酸亚铁(II)铵处理

C:硫酸铵亚铁(II)和2,2'-联吡啶(Bpy)处理

与对照组的细胞相比,用硫酸亚铁(II)铵处理的HeLa细胞的FerroOrange荧光强度增加。 相反,在用Bpy处理的细胞中,其荧光强度降低。 因此,证明FerroOrange与细胞内Fe2+反应。

FerroOrange检测HeLa细胞中的Fe2+

1.HeLa细胞接种在μ-Slide 8 well plate (ibidi)中,在5% CO2培养箱内,37培养过夜。
2.
HBSS洗涤3次。
3.
将含有FerroOrange1 μmol/ L)和2,2'-联吡啶(Bpy)(100 μmol/ L)的HBSS溶液添加到细胞中,375% CO2培养箱中孵育30min

 4.在共聚焦荧光显微镜下观察细胞。

  

FerroOrange检测细胞内Fe2+

Ex / Em = 561 nm / 570-620 nm                                比例尺20μm

A:对照组

B 2,2'-联吡啶(Bpy)处理

 

与对照组的细胞相比,Bpy处理的HeLa细胞的FerroOrange荧光强度降低。 因此,证明FerroOrange与细胞内Fe2+反应。