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  • 分 子 式: C19H21BrFeN3O9
  • 分 子 量: 571.13
  • 外      观: 黄棕色粉末
  • 别      名: p-Bromoacetamido benzyl-EDTA, iron(III)
  • 纯      度:
  • 储存条件: -20
  • 运输条件: 室温
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FeBABE
货号: F279
(s)-[1-[[Bis(carboxymethyl)amino]methyl]-2-[4-[(2-bromoaccetyl)amino]phenylethyl]-(carboxymethyl)amino]acetic acid iron(III)
(s)-[1-[[双(羧基甲基)氨基]甲基]-2-[4-[(2-溴乙酰基)氨基]苯基乙基]-(羧基甲基)氨基]乙酸铁(III)
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1 mg1710期货

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溴乙酰胺苯甲基-EDTABABE)为一种螯合标记试剂,它可以与巯基结合。BABE的铁螯合物(FeBABE)是确定蛋白质三维结构以及蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA复合物结合结构的独特工具。BABE通过其巯基将EDTA基团加入蛋白质中。一旦连接到蛋白质上,FeBABE便切掉一邻近肽或DNA链。切割位点位于FeBABE结合位点的12埃之内。铁(II)螯合物在过氧化氢的存在下切割肽或DNA链。切割反应完成速度非常快;孵育10秒到20分钟就足够了。可用凝胶电泳(例如SDS-PAGE)对切割片断的大小进行分析。

 

标记过程

1. 4下,在结合物缓冲液(10-20 mM MOPS0.2 M NaCl2 mM EDTA5%丙三醇,pH 8.0)中透析蛋白质溶液过夜。

2. 透析后,将蛋白质溶液浓度调至15-30 mM

3. 1 ml蛋白质溶液中加入20 mMFeBABE 15 μl并在37下孵育1小时。FeBABE的终浓度为0.3 mM10-20×过量于蛋白质)。

4. 4下,在蛋白质储存液(10-20 mM Tris0.1-0.2 M KCl10 mM MgCl20.1 mM EDTA50%丙三醇,pH 7.6)中过夜透析上述反应混合物。