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  • 分 子 式: C47H51N3O22
  • 分 子 量: 1009.91
  • 外      观: 灰黄色固体
  • 别      名: Indo 1-AM
  • 纯      度: 97%以上(HPLC)
  • 储存条件: -20
  • 运输条件: 室温
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Indo 1-AM
货号: I005
1-[2-Amino-5-(6-carboxy-2-indolyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester
CAS号: 112926-02-0
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1 mg1540现货

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Indo 1是一种经过改进的适用于比率法的钙指示剂、钙荧光探针。两个用于Indo 1比率法检测的发射波长分别为410 nm480 nmIndo 1适合使用流式细胞仪通过比率法检测,这样可以测得双波长的荧光信号。有报道称Indo 1在进入细胞后的定位能力要强于Fura 2Indo 1-AMIndo 1 的乙酰甲酯衍生物,它通过培养能够进入活细胞。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

操作说明(for Human T cells)*
试剂:
2 mM
Indo 1-AM/DMSO
Pluronic F127
Hanks' balanced salt solution (HBSS)
HEPES buffer saline (10 mM HEPES, 1 mM Na2HPO4, 137 mM NaCl, 5 mM KCl, 1 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 5 mM glucose, 0.1% BSA, pH 7.4)

操作:

1. 配制2mM的Indo 1-AM/DMSO溶液即:将1mg Indo 1-AM溶于495ulDMSO中(推荐现配现用)。
2.Pluronic F127先用DMSO配制成5%W/V)的溶液,室温保存。使用时加入到上述Indo 1-AM/DMSO溶液至终浓度0.05%W/V.
 Pluronic F127可以防止Indo 1-AMHBSS中聚合并能帮助其进入细胞。
3. HBSS稀释Indo 1-AM溶液,制备4 µM的Indo 1-AM working solution
4. 将Indo 1-AM working solution加入细胞,在37 培养20分钟。
5. 加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS,再继续培养40分钟。
6. HEPES buffer saline洗涤细胞3次,然后用HEPES buffer saline使细胞重悬浮,制成1x105 cells/ml的溶液。
7. 37 下培养10 分钟,然后用该细胞进行荧光钙离子检测。
8.
观察528 nm (excitation: 490-500 nm)时的荧光。
*
标记的条件因细胞种类而异,在每次实验前,请先确定最佳条件。以上方法仅供参考。