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  • 分 子 式: C51H41N2O8P
  • 分 子 量: 840.85
  • 外      观: 深红色结晶状粉末或固体
  • 别      名:
  • 纯      度: 90%以上 (HPLC)
  • 储存条件: 0-5
  • 运输条件: 室温
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Liperfluo
货号: L248
N-(4-Diphenylphosphinophenyl)-N'-(3,6,9,12-tetraoxatridecyl)perylene-3,4,9,10-tetracarboxydiimide
N-(4-二苯膦苯基)-N'-(3,6,9,12-四氧三癸基) 苝-3,4,9,10-四羧酰二亚胺
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50 ug × 52470现货

  • 产品特性
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  • 参考文献
Liperfluo是Spy-LHP的类似物,可用于检测脂质过氧化物 (LPO),
Liperfluo会被脂质过氧化物特异性氧化 而在乙醇等有机溶剂中发出很强的荧光 (图1,2)。
由于氧化型Liperfluo的激发和发射波长分别为524 nm和 535 nm (均为长波长),
因此可以减轻光对测定样品的损伤和降低样品的自发荧光。
由于Liperfluo在二异喹 啉环的一个末端连接有四乙二醇基团,
因此提高了它在水溶液中的分子分散性。
虽然它的氧化型在水溶液 中几乎没有荧光,
但是在细胞膜等脂溶性高的部位会产生较强的荧光。
因此Liperfluo适用于活细胞中脂质 过氧化物的荧光成像或流式分析。
 
 
配制 1 mmol/l Liperfluo DMSO Stock Solution 在含有50 g Liperfluo 的管子中加入60 l 新鲜无水的DMSO,用移液器反复吹打,最后用涡漩振荡器振荡 直至肉眼观察完全溶解,制备成1 mmol/l 的Liperfluo溶液。染色时Liperfluo溶液可以直接加到细胞悬液中去 或用无血清培养基等稀释,调整到合适的浓度(1-20 mmol/l)后使用。
※Liperfluo管子的管壁上可能会有粉末残留,请用    DMSO溶液反复吹洗,直至粉末完全被洗脱下来    并溶解。 
※由于Liperfluo见光易分解,因此配制好的Liperfluo    溶液需用铝箔纸包裹并在1天内用完。
※如果Liperfluo无法完全溶解,请在避光    的同时用超声或用40℃水浴加热3 min    的方法帮助溶解。 
※采用超声处理时,请按下图所示,在管    子底部注水排除空气后再进行超声。
操作步骤
1.在dish等容器中接种细胞并培养。
2.去除培养基后,用无血清培养基清洗一次。
3.加入合适浓度的Liperfluo工作液,在37℃培养30 min。
※请根据细胞种类,诱导药物等实验条件,摸索最佳的Liperfluo工作液浓度。
4.去除上清液后,用无血清培养基清洗2次。
5.用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。
 
实验例1 
用激光共聚焦荧光显微镜观察HeLa细胞
1) 在 -slide 8孔板中 (ibidi公司) 接种HeLa细胞 (3.0×104      个/孔、含血清MEM培养基),在37℃ 5%的CO2培养箱中     过夜培养。
2) 去除培养基,用无血清MEM培养基清洗细胞1次。
3) 将200 l用无血清MEM培养基稀释的1 mol/l的Liperfluo     溶液加入8孔板中,在37℃ 5%的CO2培养箱中培养30 min。
4) 去除溶液,用200 l HBSS清洗2次。
5) 均匀地加入200 l用HBSS稀释的500 mol/l的 t-BHP      (tert-Buthyl Hydroperoxide) 溶液,在37℃ 5%的CO2培养箱中培养60 min。
6) 用共焦荧光显微镜观察 (激发波长:488 nm,发射波长:500-550 nm)。
 
实验例2
用流式细胞仪检测HeLa细胞
1) 将HeLa细胞 (1.0×105个/孔、含血清MEM培养基) 接种至6孔板     (Thermo公司) 中,在37℃ 5%的CO2培养箱中过夜培养。
2) 去除培养基,用无血清MEM培养基清洗细胞1次。
3) 将2 ml用无血清MEM培养基稀释的1 mol/l的Liperfluo溶液加入     6孔板中,在37℃ 5%的CO2培养箱中培养30 min。
4) 去除溶液,用2 ml HBSS清洗2次。
5) 均匀地加入2 ml用HBSS稀释的500 mol/l的t-BHP (tert-Buthyl      Hydroperoxide) 溶液,在37℃ 5%的CO2培养箱中培养60 min。
6) 用胰酶消化细胞后,用含有血清的MEM培养基重悬细胞,移至     管中并将培养基更换为HBSS。
 7) 用流式细胞仪检测 (激发波长:488 nm,发射波长:515-545 nm)。
 
实验例3
用Erastin诱导铁死亡细胞的荧光成像
1) 在 -slide 8孔板中 (ibidi公司) 接种A549细胞 (1.0×105     个/孔、含血清DMEM培养基),在37℃ 5%的CO2培养     箱中过夜培养。
2) 去除培养基,加入200 l用无血清DMEM培养基稀释的     50 mol/l的Erastin溶液,在37℃ 5%的CO2培养箱中过     夜培养。
3) 去除培养基,用200 l HBSS清洗2次。
4) 去除HBSS,加入200 l用HBSS稀释的1 mol/l的Liperfluo     溶液,在37℃ 5%的CO2培养箱中培养30 min。
5) 去除溶液,用200 l HBSS清洗2次。
6) 用激光共焦荧光显微镜观察 (激发波长:488 nm,发射波长:500-550 nm)。